Efecto fotodinámico de Soranjidiol sobre amastigotes intracelulares de Leishmania braziliensis

Resumo

El estudio de nuevos tratamientos sobre la forma amastigote (A) de Leishmania es importante, ya que estas se multiplican dentro de los macrófagos (M), propagando la infección dentro del ser humano. Soranjidiol (Sor) es un compuesto (género Heterophyllaea) que posee propiedades fotosensibilizadoras. Se estudió el efecto de Sor sobre M de la línea celular J774.A1, infectados con A de L. braziliensis y empleando LED blanco.

Se coinfectaron 2x10⁵ M/pocillo con un MOI 1:10 de promastigotes. Luego de 24 h, se adicionaron a la microplaca los siguientes ensayos, resguardados de la luz (n=3): control negativo (CN, sólo con PBS), Anfotericina B 0,5 µM (Anf), y Sor a 5 y 10 µM (concentraciones de Sor no citotóxicas para M). Para las condiciones de irradiación (n=3), se incluyeron: CN (CN-L) y Sor a 5 y 10 µM (Sor-5L y Sor-10L). Luego de 10 min (tiempo de pre-irradiación), fueron irradiadas con LED (dosis: 11 J/cm2) durante 15 min. Al finalizar, las soluciones fueron reemplazadas por medio RPMI incubándolas durante 72 h. Realizamos la tinción con Giemsa para determinar la tasa de infección (TI): n° de A intracelulares/M infectados por el porcentaje de infección. Para la comparación de los tratamientos se realizó un ANOVA de dos vías y el test post hoc de Bonferroni.

Las TI luego del tratamiento con Sor en oscuridad y a ambas concentraciones, no presentaron diferencias significativas respecto al CN (509,1 ± 33,5). La fotoactivación de Sor-5L redujo la TI (354,6 ± 47,6) en un 27 % respecto al CN-L (486,3 ± 8,8, p<0,05) y fue similar a la que se obtiene con Anf (347,5 ± 38,6). Para Sor-10L se obtuvo una mayor reducción de la TI (184,9 ± 67,0, p<0,0001), que representa un 62 % menos respecto al CN-L.

En conclusión, el tratamiento con Sor y LED blanco redujo significativamente la TI de manera dosis dependiente. Estos resultados concuerdan con los obtenidos en ensayos previos sobre  L. amazonensis, lo cual motiva a continuar con el estudio de Sor y/o la implementación de una terapia combinada con Anf, a fin de lograr un tratamiento efectivo y accesible para la leishmaniasis cutanea.