Inmunofluorescencia directa de SARS-CoV-2: implementación de un diagnóstico rápido a partir de muestras de pacientes con Covid19 de Córdoba

Resumen

El virus SARS-CoV-2 genera la enfermedad COVID-19, siendo el diagnóstico temprano muy importante, para prolongar la supervivencia de los pacientes y garantizar la seguridad de la población. El objetivo de esta investigación fue implementar un diagnóstico rápido de SARS-CoV-2 basado en una técnica detectora de antígeno viral por inmunofluorescencia (IFD).

Muestras Covid-19(+) remitidas por los centros asistenciales colaboradores se procesaron siguiendo las medidas de seguridad recomendadas, se realizaron un total de 165 improntas positivas y 59 improntas negativas. Dichas improntas aplicaron para optimizar/estandarizar la IFD siguiendo el procedimiento habitual. Los anticuerpos  primarios: sueros policlonales de pacientes convalecientes; gammaglobulinas y anticuerpos monoclonales. Los conjugados: anticuerpos secundarios policlonales de cabra contra IgG de ratón y de origen humano, y de ratón contra IgG humana marcados con FITC. Se utilizaron un total de 33 improntas por cada anticuerpo primario. Se determinaron sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo (VPP) y (VPN) de la técnica utilizando el programa estadístico R-medic.

Los resultados muestran imágenes con buenos patrones de fluorescencia definidos para cada anticuerpo primario, junto a los controles correspondientes. Los valores de evaluación de la técnica se obtuvieron realizando los análisis en comparación con la técnica RT-PCR. Los resultados fueron similares para el Suero post-infección y Suero post-vacunal: sensibilidad de la IFD fue de 82%, especificidad de 64%, VPP fue de 82% y VPN fue de 64%; Suero post-infección con título: sensibilidad de la IFD fue de 84%, especificidad de 57%, VPP fue de 73% y VPN fue de 73%; Gammaglobulina: sensibilidad de la IFD fue de 85%, especificidad de 67%, VPP fue de 92% y VPN fue de 50%; Monoclonales Anti-N y Anti-RBD: sensibilidad de la IFD fue de 92% , especificidad de 78%, VPP fue de 92% y VPN fue de 78%.  Obteniendo buenos valores de sensibilidad, especificidad, VPP y VPN.

Esta investigación comunica por primera vez en Córdoba, el desarrollo de un método diagnóstico directo de SARS-CoV-2 por IFD “in house”, notablemente relevante para ser aplicado en el tamizaje inicial como diagnóstico diferencial cuando esta infección forme parte de las IRAs estacionales, yendo desde la pandemia a la endemia regional.