Incremento em la producción de colagenasa en incubado de sino viocitos de pacientes con artritis reumatoidea y osteoartrosis

Resumen

El cartílago articular ar es un tejido paucicelular. con colágeno y proteoglicanos en la matriz extracelular. Su degradación es función de los sinoviocitos, que segregan metal oproteasas que catabolizan a los proteoglicanos. Se distinguen los sinoviocitos A o macrofágicos y los sinoviocitos B o fibrohiásticos. La destrucción de proteoglicanos puede ser UI'- dependiente o independiente.
Nuestro objetivo fue estudiar ex u/ro el rol de los sinoviocitos, sin la influencia del sistema inmune. Líquido sinovial de pacientes de ambos sexos, 70±2años, Con OA(6) y AR(6), vírgenes de tratamiento, se centrifugó 30 minutos a 1500 g. para aislar sinoviocitos.
El sedimento se incubó 6 hs en medio Dulbecco-Eaglcs, con 26 mM de HEPES Gibco, NaHCO3 ( 0.5g/1), gl ut.am i na (2 mM),
estreptomicina l OOmg/l). penicilina (1 U/mI) y anfotericina 13 (2.5mg/l ). Identidad y viabilidad celulares se determinaron con técnicas citopatológicas. Las muestras control provinieron de artritis traumática o patología osleoarticular no-inflamatoria.
Con an' icuerpos monoclonales antiMMPs( loftg/ml), previo bloqueo de producción de proteínas incspecíficas con albúmina
sérica bovina, se midió actividad colagenasa MM P-1) antes y después de incubar con ELISA-doble-sandwich. Con streptavidinperox idasa se desarrolló color y por absorbancia a 410 nm. se leyó la complejación de los anticuerpos marcados.
La secreción de MMP- 1 por sino viocitos AR fue 1373±115 ng/ml. Con 6 hs de incubado aumentó hasta 2 143± 132ng/l Rey. I'ac. Cienc. 1Ied Córdoba 57 (1) 51-57- 2000 (-5617c)(p<0.000 1). probablemente por lah i perce 1 uI ari dad. Los sinoviocitos OA secretaron 276 ± 23 no/ml . y 542 ± 47 ng/ml tras la incubación (9611;)(p<0.001). Hay paralelismo entre la producción de
MMP-1 y la observación microscópica. Sinoviocitos con abundante citoplasma corresponden a altos niveles de enzima. La baja secreción de MMPs responde a escasa población celular y núcleos picnóticos. Aunque en AR la producción de MMPs fue 4.6 veces mayor que en OA, en cambio el incremento porcentual tras la incubación fue casi el doble en OA ClUC en AR.
Esos resultados confirman que la producción enzi mát ca varía con la in tianiación, que es mayor en los procesos agudos, y que la
incubación de sinoviocitos permite detectar cambios patológicos locales