Comunicaci�n corta/Short communication
Efecto de carboplatino sobre malondialdeh�do como marcador de lipoderoxidaci�n
en gl�ndula submandibular de ratas
Effect of carboplatin
on malondialdehyde as a marker of lipoderoxidation
in the submandibular gland of rats
Bachmeier Evelin1, Migueles Goitea Mar�a
Elena1, Linares Jorge Alberto1, Ferreyra Mariani Emma G1.
Wietz Fernando M 1, Dubersarsky Claudio G1, Brunotto Mabel N2,
Mazzeo Marcelo A1.
1. C�tedra de Fisiolog�a. Facultad de Odontolog�a.
Universidad Nacional de C�rdoba.
2. C�tedra de Biolog�a Celular �A�. Facultad de
Odontolog�a. Universidad Nacional de C�rdoba.
Correspondencia/Corresponding
Dr. Marcelo Mazzeo
C�tedra de Fisiolog�a.
Facultad de Odontolog�a, Universidad Nacional de C�rdoba,
Pabell�n Argentina s/n Ciudad Universitaria.
CP. 5016. C�rdoba. Argentina.
Te: +54-0351-4333032
Correo electr�nico / E-mail: marcelo.mazzeo@unc.edu.ar
Received: 21 November 2020; Accepted: 12 May
2021; Published: 4 August 2021
Abstract
The objective of the
present work was to evaluate the effect of carboplatin (Cp) on submandibular
gland homogenate of Wistar rats through the determination of malondialdehyde
levels, as the main end product of lipoperoxidation, in an experimental model. Sixteen
three-month-old male Wistar rats were used, housed in individual cages, with
controlled temperature and lighting and free diet. A completely randomized
design was used and two experimental groups were established: 1) Control (C),
administering an intraperitoneal dose of saline solution for one day, n: 8, 2)
Animals treated with carboplatin (Cp) applying a dose i.p.
of 100 mg / Kg of body weight for one day, n: 8. The animals were fasted for 24
hours and subsequently anesthetized. Then both submandibular glands were
removed. Malondialdehyde levels were analyzed in submandibular gland homogenate
in both experimental groups. Variations between the groups analyzed were
evaluated using the Student's t test for paired
samples, setting a p-value <0.05 for statistical significance. Project
approved by CICUAL. Faculty of Medical Sciences (UNC). The group of Rats C o
showed a concentration of 7.32 � 0.48 �mol / mg of gland. The Cp group had a
concentration of 12.57 � 0.71 �mol / mg of gland, expressing a significant
decrease compared to the control group p <0.0006. Cp at the dose tested
would cause a decrease in lipoperoxidation in the submandibular gland of rats.
Possibly the glandular antioxidant battery would neutralize the oxidative
stress of acinar cells. These results suggest a future evaluation of superoxide
dismutase (SOD) activity and uric acid (UA) levels.
Key words: Wistar rats,
carboplatin, malondialdehyde, submandibular gland.
Resumen
El
objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de carboplatino (Cp) en homogenato de gl�ndula
submandibular de ratas Wistar a trav�s de la
determinaci�n de los niveles de malondialdehido
(MDA), como principal producto final de la lipoperoxidaci�n, en un modelo
experimental. Se utilizaron 16 ratas Wistar macho de
tres meses de edad, alojadas en jaulas individuales, con temperatura e
iluminaci�n controlada y dieta libre. Se utiliz� un dise�o completamente
aleatorizado y se establecieron dos grupos experimentales: 1) Control (C),
administr�ndose una dosis intraperitoneal de soluci�n salina durante un d�a, n:
8, 2) Animales tratados con carboplatino (Cp)
aplic�ndose una dosis i.p. de 100 mg/Kg de peso
corporal durante un d�a, n: 8. Los animales fueron ayunados por 24 horas y
posteriormente anestesiados. Seguidamente se extirparon ambas gl�ndulas
submandibulares. Se analizaron los niveles de malondialdehido
en homogenato de gl�ndula submandibular en ambos
grupos experimentales. Las variaciones entre los grupos analizados se evaluaron
mediante prueba T de Student para muestras apareadas,
fijando un p-valor <0,05 para significaci�n estad�stica. Proyecto aprobado
por CICUAL. Facultad de Ciencias M�dicas (UNC). El grupo de Ratas C mostr� una concentraci�n de 7.32 � 0.48 �mol/mg de
gl�ndula. El grupo Cp tuvo una concentraci�n de 12.57
� 0,71 �mol/mg de gl�ndula, expresando una disminuci�n significativa respecto
del grupo control p<0.0006. Cp en la dosis
ensayada provocar�a una disminuci�n de la lipoperoxidaci�n en gl�ndula
submandibular de ratas. Posiblemente la bater�a antioxidante glandular
neutralizar�a el estr�s oxidativo de las c�lulas acinares. Estos resultados
sugieren evaluar a futuro la actividad de super�xido dismutasa (SOD) y niveles
de �cido �rico (AU).
Palabras
clave: ratas
Wistar, carboplatino, malondialdehido,
gl�ndula submandibular.
Introducci�n
Carboplatino pertenece a un grupo de
f�rmacos denominados compuestos de coordinaci�n de platino, que se utilizan
para el tratamiento del c�ncer. Es un an�logo de cisplatino y act�a como agente
alquilante.1,2 Se caracteriza en su mecanismo de acci�n porque atraviesa
f�cilmente la membrana celular por difusi�n pasiva. En el citoplasma, donde la
concentraci�n de iones cloruro desciende, la mol�cula sufre hidr�lisis. Cede
sus iones cloro y se intercambian por grupos hidroxilos. Estos grupos
reaccionan con diferentes mol�culas del espacio intracelular, entre las que se
cuentan prote�nas y el propio ADN. Se une de forma covalente al ADN (con la
guanina y adenina) para producir enlaces cruzados intracatenarios
principalmente, modificando la estructura del ADN e inhibiendo la s�ntesis y la
funci�n del mismo. 3,4
Est� indicado
para el tratamiento del carcinoma de ovario, testicular, de cabeza y cuello y
de pulm�n en combinaci�n con otros agentes quimioterap�uticos. 5-8
Hasta la actualidad,
las reacciones t�xicas m�s com�nmente descriptas fueron las respiratorias,
genitourinarias, cardiovasculares, gastrointestinales, supresi�n de la funci�n
de la m�dula �sea, toxicidad hematol�gica, neurotoxicidad, nefrotoxicidad (menos
frecuente) ototoxicidad y otras anormalidades sensoriales como defectos
visuales. Otros efectos adversos descriptos fueron dolor, astenia y alopecia. 9,10
En la cavidad bucal
fueron reportadas lesiones a nivel de las mucosas (mucositis) y alteraciones en
la percepci�n del gusto. 11-13
La literatura actual
no ha mostrado posibles efectos de carboplatino sobre la estructura y funci�n
de las gl�ndulas salivales. A partir de estos antecedentes nuestro laboratorio
analiz� el efecto de carboplatino sobre la lipoperoxidaci�n de c�lulas acinares
de gl�ndula submandibular, midiendo la concentraci�n de malondialdehido
en un modelo animal.
Material
y M�todos
Fueron utilizadas 16 ratas Wistar macho de tres meses de edad, alimentadas ad libitum
con dieta balanceada y agua, mantenidas a temperatura controlada de 24�C y bajo
ciclos de luz/oscuridad de 12 horas. Se establecieron dos grupos experimentales
(dise�o apareado): 1) Control (n=8) (C), con administraci�n de soluci�n
salina intraperitoneal (ip) una sola dosis durante un
d�a, 2) Problema (n=8) (P); tratadas con carboplatino (Cp): (nombre comercial: carboplatino LKM� 150 mg. Polvo liofilizado), 100 mg/Kg de peso
corporal (ip), una sola dosis durante un d�a.
Posteriormente los animales fueron ayunados por 24 horas y luego anestesiados
(Tabla 1). Seguidamente
se extirparon ambas gl�ndulas submandibulares y los animales fueron
sacrificados mediante dislocaci�n cervical. Se analizaron los
niveles de MDA en homogenato de gl�ndula
submandibular en ambos grupos con un kit de micro-elisa
para MDA (laboratorio Abcam).
El presente estudio fue aprobado por el
Comit� de �tica en cuidado de animales de laboratorio de la Facultad de
Ciencias M�dicas (CICUAL-UNC con fecha 21/07/2014).
Tabla 1. Dise�o Experimental
|
D�a |
Control (C) |
Carboplatino (Cp) |
n |
|
1 |
Soluci�n salina |
100 mg/Kg |
8 |
|
2 |
Ayuno |
Ayuno |
8 |
|
3 |
Sacrificio |
Sacrificio |
8 |
An�lisis Estad�stico
Las variaciones de
los niveles promedio de MDA se evalu� mediante prueba T de Student
para muestras apareadas, fijando un p-valor <0,05 para significaci�n
estad�stica.
Resultados
En el presente
estudio experimental, las ratas C mostraron una concentraci�n de MDA de 7.32
� 0.48 �mol/mg de gl�ndula, en tanto que el grupo tratado con (Cp) tuvo una concentraci�n de 12.57 � 0,71 �mol/mg de
gl�ndula, expresando un aumento significativo respecto del grupo control, p=0.0006.
(Fig. 1).
Figura 1: Concentraci�n de
MDA en grupos Control (C) y Carboplatino (Cp). Grupo
C: 7.32 � 0.48 �mol/mg de gl�ndula, vs. Grupo P.
12.57 � 0,71 �mol/mg de gl�ndula. p<0.0006.
Discusi�n
Las gl�ndulas salivales
par�tidas, submandibulares (submaxilares) y sublinguales representan
aproximadamente el 90% del total de producci�n humana de saliva. Se trata de gl�ndulas
importantes que participan en el mantenimiento de la homeostasis de la cavidad bucal.
Su principal funci�n es la secreci�n salival y por su intermedio la realizaci�n
de otras numerosas acciones de vital importancia para el sistema
estomatogn�tico14, 15 Son escasos los estudios sobre los efectos
toxicol�gicos de las drogas antineopl�sicas en las gl�ndulas salivales.
Algunos reportes hacen referencia a la acci�n
de carboplatino sobre la funcionalidad de las gl�ndulas salivales durante el
tratamiento por quimioterapia, en los que someramente se ha descripto el
s�ntoma subjetivo de xerostom�a asociado a mucositis, como consecuencia del
tratamiento con esta droga antineopl�sica.16,17
Diversos estudios cl�nicos y
experimentales han demostrado con eficacia comprobada que la lipoperoxidaci�n
es un paso importante para el diagn�stico del estr�s oxidativo a nivel tisular
en gl�ndulas salivales.18-20
�Por su parte, las gl�ndulas
salivales y la saliva de rata poseen estrecha similitud con la del hombre en
los mecanismos de secreci�n, composici�n y funci�n por lo que ha probado ser un
buen modelo para su estudio.21
Ensayos previos de nuestro laboratorio a
nivel cl�nico y experimental han demostrado en otras drogas antineopl�sicas no
solo alteraci�n de los niveles de lipoperoxidaci�n a trav�s de la medici�n de malondialdehido, sino tambi�n de la bater�a antioxidante
enzim�tica y no enzim�tica por medio de la determinaci�n de la actividad de
Super�xido Dismutasa y la determinaci�n de los niveles de �cido �rico
respectivamente.22-23
En el presente trabajo, Carboplatino en
la dosis ensayada de 100mg/Kg de peso corporal provoc� un aumento significativo
de la lipoperoxidaci�n en gl�ndula submandibular de ratas. Esto podr�a
desencadenar un incorrecto funcionamiento de los mecanismos de secreci�n
salival de la gl�ndula submandibular responsable del 70% de la secreci�n basal.24
Posiblemente la toxicidad inducida por
Carboplatino, haya afectado el balance entre agentes oxidantes y antioxidantes
observado por el incremento del MDA a nivel glandular. Estos resultados sugieren evaluar a futuro la
actividad de super�xido dismutasa y los niveles de �cido �rico como principales
antioxidantes frente al estr�s oxidativo provocado por las drogas oncol�gicas
como el carboplatino durante el tratamiento por quimioterapia.
Agradecimientos
Agradecemos
a la Secretar�a de Ciencia y T�cnica de la Universidad Nacional de C�rdoba (SeCyT) por el financiamiento del presente proyecto de
investigaci�n.
Todos los autores declaran que no existen conflictos potenciales de
inter�s con respecto a la autor�a y / o publicaci�n de este art�culo.
All authors declare no potential conflicts
of interest with respect to the authorship and/or publication of this article.
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