evaluación de loS micromiceteS aSociadoS a la corteza

de freSno en buenoS aireS (argentina): Su caPacidad

Para degradar madera y tolerancia a metaleS PeSadoS

evaluation of micromyceteS aSSociated with green-aSh barK in buenoS

aireS (argentina): their ability to degrade wood and tolerance to

heavy metalS

1

2

3

& Sonia Rosenfeldt

Liliana Evelin Navarro * , Laura Levin

Summary

Background and aims: Environmental pollution can aﬀect tree health and biodiversity

of microorganisms, among them fungi, existing in the bark. Fraxinus pennsylvanica

Marsh. is the most cultivated tree in Buenos Aires city. The purposes of this work

were to screen the micromycetes present in green-ash wood and bark, to determine

if the micromycetes most frequently associated with ash bark produce lignocellulolytic

enzymes, to describe the anatomical changes they caused in wood and to evaluate

their tolerance to Cu and Pb as indicators of environmental pollution.

M&M: Barks and wood were collected along an urban-periurban gradient. The decay

caused in vitro in green-ash wood by the most frequently isolated micromycetes was

evaluated, anatomical characters were described. The production of lignocellulolytic

enzymes by these fungi and their tolerance to Cu and Pb was assessed.

1

.

Laboratorio de Micología,

Fitopatología Liquenología,

Facultad de Ciencias Exactas

Naturales, Departamento

de Biodiversidad Biología

y

Experimental, Universidad de

Buenos Aires, INMIBO-CONICET,

Buenos Aires, Argentina.

2

. Laboratorio de Micología

Experimental, Facultad de Ciencias

Exactas y Naturales, Departamento

Results: Diplodia sp., Fusicoccum sp. and Sordaria sp. were the most frequently found

micromycetes in green-ash bark, whereas Alternaria sp., Diplodia sp. and Phialophora

sp. were isolated from wood. None of them caused symptoms of soft rot. They colonized

ash wood in vitro but neither important wood weight losses were detected (3-5% after

de Biodiversidad

y Biología

Experimental, Universidad de

Buenos Aires, INMIBO-CONICET,

Buenos Aires, Argentina.

6

months) nor micro anatomical relevant changes. Cellulolytic activity was produced by

3

y

.

Laboratorio de Sistemática

Biología Reproductiva en

all the assayed micromycetes. All of them were able to grow with the addition of 250 mg/

Kg of Cu or 1000 mg/Kg of Pb.

Conclusions: The micromycetes most frequently isolated did not aﬀect tree health. Their

tolerance to high concentrations of heavy metals suggests their potential as biomonitors

of environmental pollution.

Plantas Superiores, Facultad de

Ciencias Exactas Naturales,

y

Departamento de Biodiversidad y

Biología Experimental, Universidad

de Buenos Aires, Buenos Aires,

Argentina.

Key wordS

Biomonitoring, contamination, green-ash, micromycetes.

*evelin2navarro@gmail.com

reSumen

Citar este artículo

Introducción y objetivos: La contaminación ambiental podría afectar el estado sanitario

del arbolado y la biodiversidad de microorganismos. Fraxinus pennsylvanica Marsh.

es uno de los árboles más frecuentes en la Ciudad de Buenos Aires. Los objetivos del

trabajo fueron: relevar los micromicetes presentes en la corteza y madera de fresno,

determinar si los micromicetes hallados con mayor frecuencia en la corteza producen

enzimas lignocelulolíticas, describir los principales cambios anatómicos generados en

la madera, y evaluar su tolerancia a metales pesados (Cu y Pb).

M&M: Se recolectaron trozos de corteza y madera en un gradiente urbano-periurbano.

Se evaluó el deterioro causado in vitro en la madera por los micromicetes aislados

con mayor frecuencia. Se determinó la pérdida de peso, se analizaron los cambios

anatómicos. Se determinó la producción de enzimas lignocelulolíticas y tolerancia al

Cu y Pb.

Resultados: Diplodia sp., Fusicoccum sp. y Sordaria sp. fueron los micromicetes

detectados con mayor frecuencia en corteza, mientras que Alternaria sp., Diplodia sp. y

Phialophora sp. se aislaron de madera. Ninguno causó síntomas de pudrición blanda,

ni pérdidas importantes en el peso seco de la madera (3-5% luego de 6 meses), ni

cambios microanatómicos. Se detectó actividad celulolítica en todos los micromicetes

evaluados. Todos fueron capaces de crecer en 250 mg/Kg de Cu o 1000 mg/Kg de Pb.

Conclusiones: Los micromicetes presentes en la corteza no afectarían el estado

sanitario del arbolado. Su tolerancia a altas concentraciones de metales pesados

sugiere potencialidad como biomonitores de contaminación ambiental.

NAVARRO, L. E., L. LEVIN & S.

ROSENFELDT. 2022. Evaluación de

los micromicetes asociados a la

corteza de fresno en Buenos Aires

(

Argentina): su capacidad para

degradar madera y tolerancia a

metales pesados. Bol. Soc. Argent.

Bot. 57: 671-685.

DOI: https://doi.

org/10.31055/1851.2372.v57.

n3.36749

Recibido: 18 Feb 2022

Aceptado: 19 Jul 2022

Publicado en línea: 19 Ago 2022

Publicado impreso: 30 Dic 2022

Editora: María Victoria Vignale

PalabraS clave

Biomonitoreo, contaminación, fresno, micromicetes.

ISSN versión impresa 0373-580X

ISSN versión on-line 1851-2372

671

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

introducción

Los estudios de biomonitoreo en zonas

arboladas se limitan en general a líquenes o

El fresno (Fraxinus pennsylvanica Marsh.) musgos (Lijteroﬀ et al., 2009; Milićević et al.,

es uno de los árboles más frecuentes en el 2017; Moreira et al., 2018). En Argentina, los

arbolado urbano y representa el 36% del total de líquenes Usnea amblyoclada (Carreras & Pignata,

árboles en la Ciudad de Buenos Aires (CABA) 2002) y Ramalina celastri (Pignata et al., 2004)

según el último censo de 2018 (https://data. fueron utilizados para determinar la calidad del

buenosaires.gob.ar/dataset/arbolado-publico- aire y la distribución de metales pesados en la

lineal). En la década del ’70 fue introducido provincia de Córdoba. Los musgos, como los

en nuestro país debido a su rápido crecimiento líquenes, son más sensibles a la contaminación

y resistencia a enfermedades, frío y heladas reciente y ofrecen escasa información acerca de

(

Filippini et al., 2000). Recientes investigaciones la contaminación pasada. En cambio, la corteza,

consideran a la parte externa de la corteza como como biomonitor de contaminación, posibilita el

receptor pasivo de la contaminación ambiental, seguimiento de una zona de estudio a largo plazo

dado que entre sus grietas se deposita material y permite identiﬁcar y mapear los contaminantes

particulado que inmoviliza sustancias gaseosas orgánicos e inorgánicos del aire (Chrabąszcz &

(

2

Chrabąszcz & Mróz, 2017; Moreira et al., Mróz, 2017; Alatou & Sahli, 2019; El-Khatib

018). La contaminación afecta también el et al., 2020). La corteza abarca todos los tejidos

estado sanitario del arbolado y, en consecuencia, por fuera del cambium vascular. La muerte de

a la biodiversidad de organismos que los utilizan las células por fuera de la peridermis lleva a

para su reproducción, alimentación y/o refugio distinguir entre corteza externa muerta de la

(

Schwarze et al., 2000). Entre ellos, los hongos interna viva. El ﬂoema funcional es la parte

asociados a la corteza y a la madera, que más interna de la corteza viva (Evert, 2006).

pueden manifestarse de manera endofítica y/o La corteza externa absorbe pasivamente la

patogénica (Schwarze et al., 2000; Świslowski contaminación del aire y la corteza interna podría

et al., 2020). Cuando actúan como patógenos, absorber la contaminación a través del sistema

secretan enzimas capaces de degradar la vascular, directamente del suelo. El contenido

lignocelulosa que compone las paredes celulares natural de metales en el medio ambiente es

vegetales (Stempien et al., 2017) y cuando los relativamente bajo, pero emisiones excesivas

hongos crecen como endófitos colonizan las de ellos hacia la atmósfera pueden derivar en su

plantas sin causar enfermedades produciendo acumulación en algún eslabón de la cadena tróﬁca

compuestos activos que le otorgan protección (Kabata-Pendias, 2011). Además, estos metales

contra patógenos y contra la herbivoría (Sánchez- poseen diferente capacidad para translocarse a

Fernández et al., 2013).

través de la raíz hacia el vástago. Metales como

Alrededor del 10% de todas las especies el Co, Cr, Cu, y Pb, que son continuamente

fúngicas descritas pueden causar enfermedades liberados al ambiente como resultado de distintas

en las plantas. Para ello, deben atravesar las actividades industriales (Iskandar et al., 2011),

paredes celulares vegetales, importante barrera muestran menor movilidad en comparación a

que previene el ataque fúngico, y producir otros elementos como el Ti y Cd. En base a esto,

diversas enzimas que poseen la capacidad de se puede inferir que parte de estos elementos

degradar sus principales polisacáridos: celulosa, menos móviles presentes en la corteza del

hemicelulosa y pectina (Glass et al., 2013; arbolado, puede provenir de la contaminación

Kubicek et al., 2014). La deposición de lignina del aire (Chrabąszcz & Mróz, 2017). En trabajos

en las paredes celulares vegetales incrementa previos, la corteza del fresno fue utilizada

su resistencia y la degradación de este polímero para detectar metales pesados (Catinon et al.,

aromático es un prerrequisito para la hidrólisis de 2009; 2012). Perelman et al. (2006) evaluaron

los demás componentes de la biomasa vegetal, la presencia de distintos metales pesados en

los cuales son la principal fuente de carbono y la corteza de fresno a lo largo de un gradiente

energía para los microorganismos (Janusz et al., de urbanización en el Área Metropolitana de

2

017).

Buenos Aires (AMBA), demostrando que algunas

672

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

partículas asociadas a la corteza eran de origen periurbano en el AMBA, durante los meses de

antropogénico y/o geogénico.

junio y julio de 2016 y noviembre y diciembre de

Los hongos también pueden utilizarse 2017. Las muestras colectadas correspondieron a

para monitorear la contaminación ambiental dos sectores: a) Urbano (barrio de Constitución,

por metales pesados (Lepšová, 1993). Los Ciudad Autónoma de Buenos Aires -Coordenadas

primeros trabajos con basidiomicetes, en áreas 34°37’16.1”S 58°23’09.0’’O-y barrio de

contaminadas, se limitaron a la recolección de Floresta, Ciudad Autónoma de Buenos Aires

basidiomas y la determinación de su contenido de -Coordenadas 34°38’14.8”S 58°28’36.8”O). b)

metales pesados (Cuny et al., 2001; Świslowski Periurbano (Ezeiza, Provincia de Buenos Aires

&

Rajfur, 2018). Se conoce poco sobre el -Coordenadas 34°46’45.1”S 58°32’17.8’’O).

comportamiento de los hongos saprótrofos frente Se seleccionaron aleatoriamente diez árboles

a la presencia de metales (Baldrian, 2010). en cada una de las zonas. En la zona urbana se

Iskandar et al. (2011) determinaron la capacidad muestrearon en ambas veredas. En el periurbano

de Aspergillus niger, Penicillium simplicissimum se trabajó en un área verde al costado del camino

y Trichoderma asperellum para captar Pb y Cu, de acceso al predio. En todos los casos, los

en soluciones acuosas. Oladipo et al. (2018), árboles no presentaban síntomas en su fuste y las

aislaron micromicetes ﬁlamentosos, provenientes muestras se extrajeron a la altura del pecho (1,3

de minas de oro y piedras preciosas, y analizaron m). Siguiendo los postulados de Koch (1882),

su tolerancia a diferentes concentraciones se aislaron y determinaron los micromicetes

de metales pesados. Escasos trabajos de presentes en las muestras de corteza y madera.

relevamiento de micromicetes presentes en Los micromicetes determinados se depositaron

corteza y madera se asocian al monitoreo de en la micoteca de la Facultad de Ciencias

contaminación (Kowalski et al., 1998; Barengo Exactas y Naturales de la Universidad de

et al., 2000). Existen en Argentina trabajos Buenos Aires (BAFCcult). Se seleccionaron

de relevamiento de micromicetes en árboles cepas de tres micromicetes más representativos

nativos de diferentes regiones (Sánchez et al., detectados en la corteza: Diplodia sp. (BAFCcult

2

018; Catania, 2021), pero sólo Robles (2014) 4759), Fusicoccum sp. (BAFCcult 3914). y

caracterizó el biodeterioro de madera de Platanus Sordaria sp. (BAFCcult 4761), los cuales

acerifolia también introducido en el arbolado fueron hallados en todas las zonas de estudio

público de la Ciudad de Buenos Aires, en relación y en mayor proporción que el resto. Todos los

con los agentes etiológicos, los endóﬁtos fúngicos aislamientos de un mismo género pertenecen a la

y diferentes niveles de disturbio antrópico.

misma especie. Estos hongos fueron utilizados

El presente trabajo tiene como objetivos: I) para los ensayos de pérdida de peso, detección

relevar los micromicetes presentes en la corteza y la de enzimas ligninocelulolíticas y tolerancia a

madera de fresno; II) determinar si los micromicetes metales pesados.

hallados con mayor frecuencia en la corteza,

producen enzimas lignocelulolíticas; III) describir Aislamientos y metodología

los principales cambios anatómicos que generan en

Para realizar los aislamientos se obtuvieron

la madera los micromicetes más frecuentes, a través con martillo sacabocado rodajas de madera

de microscopia óptica y microscopia electrónica de de 0,5-1 cm de espesor y 0,5 de diámetro y

barrido; IV) evaluar su tolerancia a la presencia de con cuchillo se extrajeron porciones de la

2

ciertos metales pesados (Cu y Pb) indicadores de corteza asociada (1 cm ). Las muestras fueron

contaminación ambiental.

subdivididas y esterilizadas superficialmente

con alcohol 70% (30 s), hipoclorito de sodio

1

:3 (1 min) y alcohol 50% (30 s). Se sembraron

materialeS y métodoS

4 discos de madera o 4 porciones de corteza

por caja de Petri con medio Nobles (1965) y

cloranfenicol (100 mg/1000 ml). Se incubó en

Recolección de las muestras

Se recolectaron trozos de corteza y madera de oscuridad a 22°C durante 3-5 días. Las colonias

0 fresnos, a lo largo de un gradiente urbano- desarrolladas se aislaron y se las cultivó en

3

673

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

medio agar malta (2%), a 22°C en oscuridad. de malta (2%) agarizado, al cual se le adicionó

Para la identiﬁcación se utilizaron caracteres alternativamente: carboximetilcelulosa (CMC)

morfológicos (von Arx, 1970; Carmichael et al., 0,1% para determinar actividad celulolítica

1

980; Sutton 1980; Dennis, 1981). Se realizaron (endoglucanasa), revelada con el colorante Rojo

preparados montados en KOH al 3%, ﬂoxina Congo (Carder, 1986); ácido 2,2’- azino-bis

y lactofenol. Se determinó la frecuencia de (3-etilbenzotiazolin-6-sulfónico) (ABTS) 0,5

micromicetes presentes y la diversidad de cada mM para determinar actividad ligninolítica lacasa

área mediante el índice de diversidad de Simpson (Srinivasan et al., 1995); Azure B 50 µM para

(

1949).

evaluar actividad ligninolítica lignina-peroxidasa

Archibald, 1992) y MnCl 4H O 1 mM para

(

2

Capacidad de degradación de la madera

testear actividad ligninolítica Mn-peroxidasa

Se evaluó la pérdida de peso in vitro siguiendo (Steﬀen et al., 2000). Como controles positivos se

la metodología de Job & Wright (1986). Se utilizaron Trametes versicolor (BAFCcult 4272)

inocularon 30 probetas de madera de fresno (Kuhar et al., 2015) y Pycnoporus sanguineus

de 3 x 1 x 0,5 cm con cada uno de los hongos (BAFCcult 2126) (Levin et al., 2007). Todos los

seleccionados (Diplodia sp., Fusicoccum sp. y ensayos se realizaron por triplicado.

Sordaria sp.) en medio malta (Nobles, 1965).

Las probetas fueron incubadas en oscuridad a Tolerancia a metales pesados

2

1

8°C durante 6 meses y cada 2 meses se retiraron

0 de cada tratamiento. Se extrajo el micelio de sp., Fusicoccum sp. y Sordaria sp.) en medio

Se cultivaron los micromicetes (Diplodia

la superﬁcie; 8 probetas fueron utilizadas para malta agarizado al 2%, al cual se le adicionó

determinar la pérdida de peso y 2 de ellas, para SO Cu.5H O (0; 125; 250; 500 mg/Kg) o Pb

4

2

estudios anatómicos. Probetas sin inocular fueron (C H O ) (0; 125; 250; 500 y 1000 mg/Kg). Las

2

3

2 2

utilizadas como controles.

placas se incubaron durante 13 días a 28°C en

oscuridad. Se midió el radio de crecimiento y

se determinó el índice de tolerancia al final del

Estudios anatómicos

Para los estudios de microscopía, las probetas ensayo:

se ﬁjaron en FAA (formaldehído 10%, alcohol

etílico 96° 50%, ácido acético glacial 5%,

agua destilada 35%) y luego se cortaron en

secciones transversales, longitudinales radiales y

La tolerancia fue valorada según el criterio

tangenciales de 15 µm de grosor con micrótomo establecido por Oladipo et al. (2018).

de deslizamiento. Para microscopía óptica, las

secciones se colorearon con Safranina-Fast Análisis estadístico

Green y se montaron en medio sintético PYRM

Los resultados corresponden a tres réplicas con

(

Zarlavsky, 2014). Los cortes longitudinales un error estándar menor al 5%. Para el análisis

radiales se tiñeron con lugol para determinar estadístico de los datos obtenidos, se realizó un

la presencia de gránulos de almidón. Para los análisis de varianza de una vía (ANOVA) al 5%

estudios con microscopio electrónico de barrido de nivel de significancia, utilizando el programa

(

MEB), las secciones de las probetas se secaron InfoStat (Di Rienzo et al., 2020).

a temperatura ambiente y metalizaron con oro-

paladio durante 3 min. Las fotomicrografías

fueron tomadas con el microscopio Philips XL30 reSultadoS

del Museo Argentino de Ciencias Naturales

Bernardino Rivadavia.

Biodiversidad de micromicetes en corteza y

madera de fresno

Relevamiento de la secreción de enzimas

lignocelulolíticas

En la Tabla 1, se registran los micromicetes

Los micromicetes se cultivaron durante 4 días detectados en las 3 zonas de estudio en corteza

a 28°C en placas de Petri con medio extracto y madera. En el área del periurbano (localidad

674

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

Tabla 1. Frecuencia de micromicetes según las áreas muestreadas.

Urbano (Constitución)

Urbano (Floresta)

Periurbano

Micromicete

corteza

madera

corteza

madera

corteza

madera

Alternaria sp. (Pleosporaceae)

-

1

-

2

-

2

-

1

2

1

3

1

3

-

2

-

Chaetomium globosum (Chaetomiaceae)

Cladosporium sp. (Cladosporiaceae)

Colletotrichum sp. (Glomerellaceae)

Diplodia sp. (Botryosphaeriaceae)

Ellisembia sp. (Sordariomycetes)

Fusarium sp. (Nectriaceae)

-

3

-

4

-

2

4

-

1

3

1

2

-

Fusicoccum sp. (Botryosphaeriaceae)

Neurospora seminuda (Sordariaceae)

Neurospora tetrasperma (Sordariaceae)

Nigrospora sacchari (Apiosporaceae)

Phialophora sp. (Herpotrichiellaceae)

Phoma sp. (Didymellaceae)

-

1

-

1

-

1

4

-

1

6

-

1

-

Sordaria sp. (Sordariaceae)

Sporidesmium sp. (Sporidesmiaceae)

1

de Ezeiza) se encontró mayor diversidad de de micelio a los 2 meses del inicio del ensayo,

micromicetes (Índice de Simpson: 0,89), en comparación al control (Figs. 2A; 3A).

respecto a las zonas urbanas estudiadas: barrios Las hifas colonizaron el parénquima radial y

de Constitución (0,81) y Floresta (0,82). los elementos de vaso (Figs. 2B-I; 3B-C, F).

Diplodia sp. y Fusicoccum sp. se encontraron Además, se detectaron ascosporas, algunas en

en mayor frecuencia en corteza en todas las germinación, en el lumen de los elementos de

áreas relevadas y Sordaria sp. en ambas áreas vaso, en la madera colonizada por Sordaria sp.

urbanas. En madera se detectaron Diplodia sp. (Fig. 3C). Al cabo de 6 meses, no se detectaron

(

Floresta), Alternaria sp. (Ezeiza) y Phialophora

sp. (Constitución).

Capacidad de degradación de la madera

Las probetas, en todos los casos, se cubrieron

superficialmente con micelio al mes de

incubación. Sólo se observó desarrollo de

estructuras reproductivas en dos de los tres

micromicetes: conidiomas en Diplodia sp. y

ascomas periteciales en Sordaria sp. (Fig. 1).

Se determinó la pérdida de peso que osciló

entre 3-5 % luego de 6 meses de ensayo. No se

encontraron diferencias significativas entre las

probetas inoculadas con los distintos hongos.

Fig. 1. Probetasdemaderadefresno. A:Conidiomas

de Diplodia sp. B: Ascomas periteciales de Sordaria

sp. Abreviaturas= cd: conidioma; ap: ascoma

Estudios anatómicos

En todos los casos, se observó desarrollo peritecial. Escalas= A: 10 mm; B: 1 mm.

675

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

Fig. 2. Fotomicrografías del leño de F. pennsylvanica (MEB). A: Control (sin inocular). B-D: Probetas

inoculadas con Diplodia sp. B: 2 meses, C: 4 meses, D: 6 meses. E-F: Probetas inoculadas con Fusicoccum

sp. E: 2 meses, F: 4 meses. G-I: Probetas inoculadas con Sordaria sp. G: 2 meses, H: 4 meses, I: 6 meses.

Abreviaturas= hf: hifa. Escalas= A: 50 µm; B, E-F, H: 20 µm; C-D, H: 25 µm; I: 10 µm.

cambios estructurales de relevancia. Se registró los micromicetes. No se observó el halo de

la presencia de gránulos de almidón (Fig. 3D-F). color verdoso, característico de la oxidación

del compuesto ABTS (indicativo de actividad

Relevamiento de la secreción de enzimas ligninolítica lacasa) en ningún tratamiento, pero

lignocelulolíticas

sí se produjo un halo rojizo en las placas de

Se detectó actividad celulolítica en todos Fusicoccum sp. No se observó halo de degradación

676

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

Fig. 3. Cortes del leño de F. pennsylvanica (MO). A: Control. B: Hifa de Sordaria sp. en elemento de

vaso, C: Germinación de ascospora de Sordaria sp. en elemento de vaso. D-F: Gránulos de almidón en

parénquima radial. Abreviaturas= as: ascospora; ev: elemento de vaso; ga: gránulos de almidón; hf: hifa; rx:

radio xilemático; tl: tílide. Escalas= A, D: 30 µm; B-C: 20 µm; E-F: 10 µm.

en los cultivos con Azure B, pero sí un cambio y sólo Fusicoccum sp. fue capaz de crecer en

de color hacia el verde-azulado en las placas de presencia de 500 mg/Kg (índice de tolerancia:

Sordaria sp. y Fusicoccum sp. No se observó 0,07). El agregado de 250 mg/Kg de Cu al medio

actividad Mn-peroxidasa en ningún caso (Fig. 4).

de cultivo afectó también la melanización del

micelio en Diplodia sp. y Sordaria sp.

Tolerancia a metales pesados

Los micromicetes evaluados demostraron

El agregado de 125 mg/Kg de Cu al medio de mayor tolerancia al Pb ya que concentraciones

cultivonoafectóel crecimientoni la pigmentación de este metal de hasta 500 mg/Kg no afectaron

oscura del micelio de Fusicoccum sp., tampoco su crecimiento. Para una concentración de 1000

el crecimiento de Sordaria sp. aunque sí su mg/Kg de Pb, los índices de tolerancia variaron

pigmentación. En cambio, esta concentración entre muy bajo (Fusicoccum sp.: 0,17), bajo

de Cu afectó el crecimiento de Diplodia sp. (Sordaria sp.: 0,55) y moderado (Diplodia sp.:

(

índice de tolerancia: 0,63), pero no modificó 0,63) de acuerdo al criterio establecido por

su pigmentación. Por otro lado, todos los Oladipo et al. (2018) (Tabla 2 y Figs. 5-6.)

micromicetes presentaron muy baja tolerancia a Se observó una disminución notoria de la

la presencia de concentraciones mayores de este capacidad de melanización del micelio en todos

metal, su crecimiento disminuyó en un medio los micromicetes con una concentración de 1000

con 250 mg/Kg (índices de tolerancia: 0,1-0,28) mg/Kg de Pb (Fig. 6).

677

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

Fig. 4. Relevamiento en placa de actividades lignocelulolíticas.

Tabla 2. Tolerancia de micromicetes a diferentes concentraciones de Cu y Pb (mg/Kg): muy baja (0-0,39),

baja (0,4-0,59), moderada (0,6-0,79). NT: no testeado.

Concentración (mg/Kg)

Metal

Micromicete

Tolerancia

1

25

250

1

500

1000

0,63

0,17

0,55

NT

Diplodia sp.

Fusicoccum sp.

Sordaria sp.

1

Moderada

Muy baja

Baja

Pb

1

Diplodia sp.

0,63

1

0,1

0,28

0,16

-

0,07

-

Muy baja

Cu

Fusicoccum sp.

Sordaria sp.

NT

1

NT

678

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

Fig. 5. Efecto de diferentes concentraciones de Cu (control; 125; 250 y 500 mg/Kg) sobre el aspecto de las

colonias de Diplodia sp., Fusicoccum sp. y Sordaria sp. a los 13 días de incubación.

diScuSión

probablemente con diferentes niveles de disturbio

antrópico. ElgéneroBotryosphaeria, dedistribución

Biodiversidad de micromicetes en la corteza y cosmopolita, presenta numerosas especies que

madera de fresno pueden encontrarse como saprótrofos, endóﬁtos o

En el periurbano (localidad de Ezeiza), se parásitos. Estas especies han sido objeto de estudio,

encontró una mayor diversidad de micromicetes, como parásitos, debido a que afectan a numerosos

respecto a las zonas urbanas estudiadas. Diplodia cultivos comerciales provocando grandes pérdidas

sp. y Fusicoccum sp. (Botryosphaeriaceae) fueron económicas. En Argentina, Botryosphaeria ha sido

aislados en mayor proporción en la corteza al igual el responsable de la muerte de cultivares de vid,

que Sordaria sp. (Sordariaceae). Tanto Diplodia manzanos, perales, cítricos, arándanos y árboles

como Fusicoccum se detectaron en corteza de de importancia en la industria maderera (Wright et

fresno en ambientes urbanos y periurbanos, al., 2010; Rista et al., 2011; https://www.sinavimo.

679

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

Fig. 6. Efecto de diferentes concentraciones de Pb (control; 125; 250; 500 y 1000 mg/Kg) sobre el aspecto

de las colonias de Diplodia sp., Fusicoccum sp. y Sordaria sp. a los 13 días de incubación.

680

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

gob.ar/plaga/botryosphaeria-dothidea). El género al dicatión del ABTS oxidado. Gramss (2017)

Sordaria pertenece a los Sordariomycetes, hongos reportó resultados similares asociados a actividad

saprotróﬁcos de amplia distribución (Dennis, 1981). lacasa. También se observó un cambio de color del

Los estudios en este género se enfocan en procesos medio Azure B hacia el verde azulado aunque no

morfológicos (Teichert et al., 2014), genéticos se registró decoloración del mismo. Este cambio

(

Nowrousian et al., 2012) y en producción de de coloración hacia el verde azulado, podría ser

enzimas con posibles aplicaciones biotecnológicas indicio de actividad peroxidasa (Archibald, 1992;

(

Yang et al., 2020).

Casciello et al., 2017; Lakshmi et al., 2017) en

Fusicoccum sp. y Sordaria sp. Generalmente los

Ascomycota se asocian a una pudrición blanda de

Capacidad de degradación de la madera

De acuerdo al criterio de Findlay (1967), la la madera. La habilidad para degradar lignina es

madera resultó resistente al ataque por los hongos limitada en este grupo (Cragg et al., 2015). Sólo

estudiados (pérdida de peso menor al 5 %). Los la alteran, facilitando así el acceso a la celulosa

micromicetes colonizaron los elementos de vaso y hemicelulosas. Recientemente se identiﬁcó la

y el parénquima radial. Sin embargo, durante el primera peroxidasa decolorante de tintes en un

período de ensayo no se observó una alteración Ascomycota (Xylaria grammica), pero aún no

ultraestructural de la madera. El crecimiento existen registros de actividad Mn-peroxidasa-

fúngico podría deberse al aprovechamiento de los enzima degradadora de la lignina- en hongos de

gránulos de almidón, presentes en el parénquima esta división (Kimani et al., 2021). Cabe destacar

radial, como fuente de carbono. Se ha comprobado que anteriormente Ishfaq et al. (2017) reportaron

la eﬁciente secreción de enzimas amilolíticas en actividad lacasa en Sordaria fimicola, hongo

otros miembros de la familia Botryosphaeriaceae no patogénico. Esteves et al. (2014) detectaron

como Macrophomina phaseolina (Fernandes et al., expresión de lacasas y celulasas en los 56

2

007).

aislamientos de Botryosphaeriales que relevaron.

La producción de enzimas lignocelulolíticas ha

Relevamiento de la secreción de enzimas sido escasamente estudiada en este grupo hasta el

lignocelulolíticas en placa

presente (Esteves et al., 2014).

Las micrografías de la madera deteriorada

por los micromicetes evaluados, las cuales no Tolerancia a metales pesados

mostraron cambios estructurales relevantes,

Todos los micromicetes evaluados fueron

concuerdan con los resultados de los estudios capaces de crecer con el agregado de 250 mg/Kg

sobre producción enzimática lignocelulolítica in de Cu y también con 1000 mg/Kg de Pb en placas

vitro, en los cuáles se detectó escasa producción de extracto de malta agarizada. Sólo Fusicoccum

de estas enzimas. Tampoco se detectaron síntomas sp. toleró 500 mg/Kg de Cu, mientras que Diplodia

visibles de pudrición blanda en los árboles sp. se destacó por su mayor tolerancia al Pb. Una

muestreados. Los micromicetes evaluados podrían característica asociada a algunos órdenes dentro de

estar actuando como endóﬁtos, sin expresar su Ascomycota es la producción de melanina, la cual

batería enzimática. Muchas de las especies de se deposita en la pared celular o como polímero

Botryosphaeriaceae se conocen como patógenos extracelular. Este pigmento puede actuar como

oportunistas con una fase latente endofítica y fotoprotector, intercambiador catiónico, agente

actividad patogénica en plantas sometidas a estrés quelante, y posee actividades antioxidantes y

ambiental (Slippers y Wingﬁeld, 2007; Luo et al., antimicrobianas. Protege contra un amplio rango

2

019; Hrycan et al., 2020). En este trabajo, para los de agresiones tóxicas, tanto ambientales como

tres hongos evaluados, solo se evidenció actividad producto de la respuesta inmune del hospedante

celulolìtica (endoglucanasa). En el medio con durante la infección. Tiene además un papel

ABTS utilizado para relevar actividad ligninolítica importante en la virulencia de muchos hongos

lacasa no se observó la coloración verdosa que (Cordero & Casadevall, 2017). La melanina

típicamente indica la oxidación de este compuesto, fúngica puede adsorber eﬁcientemente distintos

sin embargo, en las placas de Fusicoccum sp. se metales pesados como Pb y Zn (Fogarty & Tobin,

detectó una coloración rojiza, que podría atribuirse 1996; Iskandar et al., 2011). Los micromicetes

681

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

estudiados en este trabajo fueron capaces de crecer bibliografía

en presencia de distintas concentraciones de Pb

y Cu, asociados a contaminación ambiental, pero

sin embargo estos metales pesados afectaron la

producción de melanina. Baldrian (2010) y Kumar

et al. (2019) reportaron que los metales pesados

pueden afectar el crecimiento, la reproducción

y la producción enzimática en distintas especies

fúngicas. Cabe destacar que todos los micromicetes

evaluados resultaron tolerantes a concentraciones

de Pb y Cu que exceden los límites globales de

Cu y Pb permitidos en suelos (38,9 y 27 mg/Kg,

respectivamente) (Kabata-Pendias, 2011).

ALATOU, H. & L. SAHLI. 2019. Using tree leaves

and barks collected from contaminated and

uncontaminated areas as indicators of air metallic

pollution. Int. J. Phytoremediation . 21: 985-997.

https://doi.org/10.1080/15226514.2019.1583723.

ARCHIBALD, F. S. 1992. A new assay for lignin-type

peroxidases employing the dye azure B. Appl.

Environ. Microbiol. 58: 3110-3116.

https://doi.org/10.1128/aem.58.9.3110-3116.1992.

BALDRIAN, P. 2010. Effect of heavy metal on

saprotrophic soil fungi. In: SHERAMETI, I. & A.

VARMA (eds.). Soil Heavy Metals. Soil Biology. pp

2

63-279. Springer. Germany.

concluSioneS

https://doi.org/10.1007/978-3-642-02436-8_12.

BARENGO, N., T. N., SIEBER & O. HOLDENRIEDER.

2000. Diversity of endophytic mycobiota in leaves

and twigs of pubescent birch (Betula pubescens).

Sydowia. 52: 305-320.

CARDER, J. H. 1986. Detection and quantitation of

cellulase by congo red staining of substrates in a

cup-plate diﬀusion assay. Anal. Biochem. 153: 75-

79. https://doi.org/10.1016/0003-2697(86)90063-1.

Los micromicetes hallados con mayor

frecuencia en la corteza del fresno no afectarían

el estado sanitario del arbolado, ya que no

ocasionaron pérdidas de relevancia en el peso

seco de su madera ni se detectaron cambios

microanatómicos en las células del xilema

secundario. Estos resultados concuerdan con

la escasa producción de enzimas asociadas a CARMICHAEL, J. W., W. BRYCE KENDRICK & I.

la degradación de paredes celulares vegetales

relevada in vitro. La tolerancia a altas

concentraciones de Cu y Pb detectada en los

aislamientos de Diplodia sp., Fusicoccum sp. y

Sordaria sp. evaluados, sugiere su potencialidad

como biomonitores de contaminación ambiental.

L. CONNERS. 1980. Genera of Hyphomycetes.

University of Alberta, Canada.

CARRERAS, H. A. & M. L. PIGNATA. 2002.

Biomonitoring of heavy metals and air quality in

Cordoba City, Argentina, using transplanted lichens.

Environ. Pollut. 117: 77-87.

https://doi.org/10.1016/S0269-7491(01)00164-6.

CASCIELLO, C., F. TONIN, F. FERINI, E. FASOLI,

F. MARINELLI, L. POLLEGIONI & E. ROSINI.

contribución de loS autoreS

2

017. A valuable peroxidase activity from the

LN coleccionó el material de campo. Todos los

autores diseñaron y realizaron la investigación, su

interpretación y redacción del manuscrito.

novel species Nonomuraea gerenzanensis growing

on alkali lignin. Biotechnol. Rep. 13. https://doi.

org/10.1016/j.btre.2016.12.005.

CATANIA, M. V. 2021. Micromycetes on bark and wood

of Podocarpus parlatorei (Podocarpaceae) from

Argentina. X. Chaetosphaeria (Chaetosphaeriaceae,

Ascomycota). Bonpladia 30: 107-118.

agradecimientoS

Los autores agradecen al Consejo Nacional

de Investigaciones Científicas y Tecnológicas

http://dx.doi.org/10.30972/bon.3014670.

CATINON, M., S. AYRAULT, R. CLOCCHIATTI,

O. BOUDOUMA, J. ASTA, M. TISSUT & P.

RAVANEL. 2009. The anthropogenic atmospheric

elements fraction: a new interpretation of elemental

deposits on tree barks. Atmos. Environ. 43: 1124-

1130.

(

CONICET) (PIP 11220170100283 a LL) y

Universidad de Buenos Aires (UBA) (UBACYT

020020170100163 a LL) por el ﬁnanciamiento

2

recibido para la realización de este trabajo, y a la

Dra. Eliana Melignani por su colaboración con el

análisis estadístico.

https://doi.org/10.1016/j.atmosenv.2008.11.004.

682

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

CATINON, M., S. AYRAULT, O. BOUDOUMA,

J. ASTA, M. TISSUT & P. RAVANEL. 2012.

Atmospheric element deposit on tree barks: The

opposite effects of rain and transpiration. Ecol.

Indic. 14: 170-177.

FERNANDES, L. P., C. J. ULHOA, E. R. ASQUIERI

& V. NEVES MONTEIRO. 2007. Produção de

amilases pelo fungo Macrophomina phaseolina.

Revista Eletrônica de Farmácia 4: 43-51.

https://doi.org/10.5216/ref.v4i1.2120.

https://doi.org/10.1016/j.ecolind.2011.07.013.

CHRABĄSZCZ, M. & L. MRÓZ. 2017. Tree bark,

a valuable source of information on air quality.

Pol. J. Envirom Stud. 26: 453-466.

FILIPPINI, L. M., L. BUSTILLO, H. P. MORUZZI,

G. INOMATA, J. A. FLORENTINO & M. A.

LAUDANI. 2000. El arbolado de la Ciudad de

Buenos Aires: situación y estado actual, metodología

para su estudio, pautas para su manejo racional.

Santísima Trinidad, Buenos Aires.

FINDLAY, W. P. K. 1967. Timber pests and diseases.

Pergamon series of monographs on furniture and

timber. Pergamon Press, United Kingdom.

https://doi.org/10.15244/pjoes/65908.

CORDERO, R. J. & A. CASADEVALL. 2017.

Functions of fungal melanin beyond virulence.

Fungal Biol. Rev . 31: 99-112.

https://doi.org/10.1016/j.fbr.2016.12.003.

CRAGG, S. M., G. T. BECKHAM, N. C. BRUCE,

T. D. H. BUGG, D. L. DISTEL, P. DUPREE, A.

G. ETXABE, B. S. GOODELL, J. JELLISON, J.

E. Mc GEEHAN, S. J. Mc QUEEN-MASON, K.

SCHNORR, P. H. WALTON, J. E. M. WATTS &

M. ZIMMER. 2015. Lignocellulose degradation

mechanisms across the Tree of Life. Curr. Opin.

Chem. Biol. 29: 108-119.

https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2015.10.018.

CUNY, D., C. VAN HALUWYN & R. PESCH. 2001.

Biomonitoring of trace elements in air and soil

compartments along the major motorway in

France. Water Air Soil Pollut. 125: 273-290.

https://doi.org/10.1023/A:1005278900969

DENNIS, R. W. G. 1981. British Ascomycetes.

Strauss & Cramer, Germany.

https://doi.org/10.1016/C2013-0-01899-3.

FOGARTY, R. V. & J. M. TOBIN. 1996. Fungal melanins

and their interactions with metals. Enzyme Microb.

Technol. 19: 311-317.

https://doi.org/10.1016/0141-0229(96)00002-6.

GLASS, N. L., M. SCHMOLL, J. H. D. CATE & S.

CORADETTI. 2013. Plant cell wall deconstruction

by ascomycete fungi. Annu. Rev. Microbiol. 67:

477-498.

https://doi.org/10.1146/annurev-micro-092611-150044.

GRAMSS, G. 2017. Reappraising a controversy:

2

+

Formation and role of the azodication (ABTS ) in

the laccase-ABTS catalyzed breakdown of lignin.

Fermentation 3: 27.

https://doi.org/10.3390/fermentation3020027.

HRYCAN, J., M. P. HARTBOWEN, T. FORGE &

J. R. ÚRBEZ-TORRES. 2020. Grapevine trunk

disease fungi: their roles as latent pathogens and

stress factors that favour disease development and

symptom expression. Phytopathol. Mediterr. 59:

395-424. https://doi.org/10.14601/Phyto-11275.

ISHFAQ, M., N. MAHMOOD, I. A. NASIR & M.

SALEEM. 2017. Biochemical and molecular

analysis of laccase enzyme in saprobic fungus

Sordaria ﬁmicola. Int. J. Agric. Biol. 19: 204-210.

https://doi.org/10.17957/IJAB/15.0265.

DI RIENZO, J. A., F. CASANOVES, M. G.

BALZARINI, L. GONZALEZ, M. TABLADA

&

C. W. ROBLEDO. 2020. InfoStat. Centro

de Transferencia InfoStat, FCA, Universidad

Nacional de Córdoba, Argentina. Disponible en:

http://www.infostat.com.ar.

EL-KHATIB, A. A., N. A. BARAKAT, N.

A. YOUSSEF

& N. A. SAMIR. 2020.

Bioaccumulation of heavy metals air pollutants

by urban trees. Int. J. Phytoremediation. 22:

2

10-222.

ISKANDAR, N. L., N. A. I. M. ZAINUDIN & S. G.

TAN. 2011. Tolerance and biosorption of copper

(Cu) and lead (Pb) by ﬁlamentous fungi isolated

from a freshwater ecosystem. J. Environ. Sci. 23:

824-830.

https://doi.org/10.1080/15226514.2019.1652883.

ESTEVES, A. C., M. SARAIVA, A. CORREIA & A.

ALVES. 2014. Botryosphaeriales fungi produce

extracellular enzymes with biotechnological

potential. Can. J. Microbiol . 60: 332-342.

https://doi.org/10.1016/S1001-0742(10)60475-5.

JANUSZ G., A. PAWLIK, J. SULEJ, U. ŚWIDERSKA-

https://doi.org/10.1139/cjm-2014-0134.

EVERT, R. F. 2006. Esau′s Plant Anatomy. Meristems,

BUREK, A. JAROSZ-WILKOLAZKA &

A. PASZCYŃSKY. 2017. Lignin degradation:

rd

cells, and tissues of the plant body. 3 Ed. Willey,

Canada. https://doi.org/10.1002/0470047380.

microorganisms, enzymes involved, genomes

683

Bol. Soc. Argent. Bot. 57 (4) 2022

analyses and evolution. FEMS Microbiol. Rev . 41:

by Argentinean white rot fungi focused on biopulping

processes . Process Biochem. 42: 995-1002.

9

41-962. https://doi.org/10.1093/femsre/fux049.

JOB, D. J. & J. E. WRIGHT. 1986. Experimental wood-rot of

https://doi.org/10.1016/j.procbio.2007.03.008.

Salix humboldtiana blocks by species of Hymenochaete

LIJTEROFF, R., L. LIMA & B. PRIERI. 2009. Uso

de líquenes como bioindicadores de contaminación

atmosférica en la ciudad de San Luis, Argentina. Rev.

Int. Contam. Ambient. 25: 111-120.

(Aphyllophorales). Mater. und Org. 21: 301-310.

KABATA-PENDIAS, A. 2011. Trace elements in soils and

planta. 4th ed. CRC Press, USA.

KIMANI, V., R. ULLRICH, E. BÜTTNER, R. HERZOG,

H. KELLNER, N. JEHMLICH, M. HOFRICHTER

LUO, Y., P. S. F. LICHTEMBERG, F. J. A.

NIEDERHOLZER, D. M. LIGHTLE, D. G. FELTS &

T. J. MICHAILIDES. 2019. Understanding the process

of latent infection of canker-causing pathogens in stone

fruit and nut crops in California. Plant Dis. 103: 2374-

2384.

&

C. LIERS. 2021. First dye-decolorizing peroxidase

from an ascomycetous fungus secreted by Xylaria

grammica. Biomolecules. 11.

https://doi.org/10.3390/biom11091391.

KOWALSKI, T. & M. GAJOSEK. 1998. Endophytic

mycobiota in stems and branches of Betula pendula to

a diﬀerent degree aﬀected by air pollution. Austrian J.

Mycol. 7: 13-24.

KUBICEK, C. P., T. L. STARR & N. L. GLASS. 2014.

Plant cell wall–degrading enzymes and their secretion

in plant-pathogenic fungi. Annual Rev. Phytopathol. 52:

https://doi.org/10.1094/PDIS-11-18-1963-RE.

MILIĆEVIĆ, T., M. A. UROŠEVIĆ, G. VUKOVIĆ, S.

ŠKRIVANJ, D. RELIĆ, M. V. FRONTASYEVA &

A. POPOVIĆ. 2017. Assessment of species-speciﬁc

and temporal variations of major, trace and rare

earth elements in vineyard ambient using moss bags.

Ecotoxicol. Environ. Saf. 144: 208-215.

427-451.

https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2017.06.028.

https://doi.org/10.1146/annurev-phyto-102313-045831.

KUHAR, F., V. CASTIGLIA & L. LEVIN. 2015.

Enhancement of laccase production and malachite green

decolorization by co-culturing Ganoderma lucidum

and Trametes versicolor in solid-state fermentation.

International Biodeterior. Biodegrad. 104: 238-243.

https://doi.org/10.1016/j.ibiod.2015.06.017.

MOREIRA, T. C., L. F. AMATO-LOURENCO, G. T. DA

SILVA, C. D. SALDIVA DE ANDRÉ, P. A. ANDRE,

L. V. BARROZO, J. M. SINGER, P. H. N. SALDIVA,

M. SAIKI & G. M. LOCOSSELLI. 2018. The use of

tree barks to monitor traﬃc related air pollution: a case

study in São Paulo–Brazil. Front. Environ. Sci. 6: 1-12.

https://doi.org/10.3389/fenvs.2018.00072.

KUMAR, A., A. K. CHATURVEDI, K. YADAV, K.

P. ARUNKUMAR, S. K. MALYAN, P. RAJA &

A. N. YADAV. 2019. Fungal phytoremediation of

heavy metal-contaminated resources: current scenario

and future prospects. In: YADAY, A., S. SINGH, S.

MISHRA & A. GUPTA (eds). Recent Advancement

in White Biotechnology through Fungi. pp. 437-461.

Springer, Germany.

NOBLES, M. K. 1965. Identiﬁcation of culture of wood-

inhabiting Hymenomycetes. Can. J. Bot. 43: 1097-

1139. https://doi.org/10.1139/b65-126.

NOWROUSIAN, M., I. TEICHERT, S. MASLOFF & U.

KÜCK. 2012. Whole-genome sequencing of Sordaria

macrospora mutants identiﬁes developmental genes.

G3: Genes/ Genomes/ Genetics . 2: 261-270.

https://doi.org/10.1534/g3.111.001479.

https://doi.org/10.1007/978-3-030-25506-0_18.

OLADIPO, O. G., O. O.AWOTOYE,A. OLAYINKA, C. C.

BEZUIDENHOUT & M. S. MABOETA. 2018. Heavy

metal tolerance traits of ﬁlamentous fungi isolated from

gold and gemstone mining sites. Braz. J. Microbiol. 49:

29-37.

LAKSHMI, K. M. S., P. S. SOUMYA, A. SHAJI & P.

NAMBISAM. 2017. Lenzites elegans KSG32: a novel

white rot fungus for synthetic dye decolourization. J.

Bacteriol. Mycol: Open Access . 5: 311-317.

https://doi.org/10.15406/jbmoa.2017.05.00138 .

https://doi.org/10.1016/j.bjm.2017.06.003.

LEPŠOVÁ,A. 1993.Applicability of fungi to the monitoring

of environmental pollution by heavy metals. In:

MARKERT, B. (ed.). Plants as Biomomitors. pp. 365-

PERELMAN, P., M. A. CASTRO, L. E. NAVARRO,

M. RECHI, M. ARRIAGA, S. LÓPEZ, M.

MARTÍNEZ CARRETERO & A. FAGGI. 2006.

Análisis multielemental de cortezas de fresno (Fraxinus

pennsylvanica) a lo largo de un gradiente urbano-

periurbano en la metrópolis de Buenos Aires. Rev. Mus.

Argent. Cienc. Nat . 8: 231-236.

378. VCH, Germany.

https://doi.org/10.13140/RG.2.2.16344.60165.

LEVIN L., L. VILLALBA, V. DA RE, F. FORCHIASSIN

&

L. PAPINUTTI. 2007. Comparative studies of

loblolly pine biodegradation and enzyme production

https://doi.org/10.22179/REVMACN.8.323.

684

L. E. Navarro et al. - Micromicetes de corteza, su capacidad de degradación y tolerancia a metales pesados

PIGNATA, M. L., C. M. GONZALEZ, E. D. WANNAZ,

H. A. CARRERAS, G. L. GUDIÑO & M. S.

MARTINEZ. 2004. Biomonitoring of air quality

employing in situ Ramalina celastri in Argentina.

Int. J. Environ. Pollut . 22: 409-429.

chrysosporium BKM-F1767. Appl. Environ.

Microbiol. 61: 4274-4277.

https://doi.org/10.1128/aem.61.12.4274-4277.1995.

STEFFEN, K. T., M. HOFRICHTER & A. HATAKKA.

1

4

2000. Mineralisation of C-labelled synthetic

lignin and ligninolytic enzyme activities of litter-

decomposing basidiomycetous fungi. Appl.

Microbiol. Biotechnol. 54: 819-825.

https://doi.org/10.1504/IJEP.2004.005678.

RISTA, L. M., R. MAUMARY, N. F. GARIGLIO & J. C.

FAVARO. 2011. Botryosphaeria dothidea (Moug.)

afectando plantaciones de manzano y duraznero de

la región centro-este de Santa Fe. FAVE- Ciencia

Agrarias 10: 45-52.

https://doi.org/10.1007/s002530000473

STEMPIEN E., M. L. GODDARD, K. WILHELM,

C. TARNUS, C. BERTSCH & J. CHONG. 2017.

Grapevine Botryosphaeria dieback fungi have

speciﬁc aggressiveness factor repertory involved in

wood decay and stilbene metabolization. PLoS ONE

12(12): e0188766.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188766.

SUTTON, B. C. 1980. The Coelomycetes. Fungi

Imperfecti with Pycnidia, Acervulli and Stromata.

CAB, United Kingdom.

https://doi.org/10.14409/FA.V10I1/2.4136.

ROBLES C. A. 2014. Biodeterioro fúngico de madera en

el arbolado urbano: prospección, histopatología y

control biológico en plátanos (Platanus acerifolia).

Tesis Doctoral. Facultad de Ciencias Exactas y

Naturales. Universidad de Buenos Aires.

SÁNCHEZ, R. M, C. C. CARMARÁN & M. V.

BIANCHINOTTI 2018. Ostreichnion

(

Dothideomycetes, Ascomycota) en los bosques

andino patagónicos (Argentina). Darwiniana 6: 47-

7. https://www.jstor.org/stable/26852065.

ŚWISLOWSKI, P. & M. RAJFUR. 2018. Mushrooms as

biomonitors of heavy metals contamination in forest

areas. Ecol. Chem. Eng. S. 25: 557-568.

5

SÁNCHEZ- FERNÁNDEZ R. E., B. L. SÁNCHEZ-

ORTIZ, Y. K. M. SANDOVAL-ESPINOSA,

Á. ULLOA-BENÍTEZ, B. ARMENDÁRIZ-

GUILLÉN, M. C. GRACÍA-MÉNDEZ & M. L.

MACÍAS-RUBALCAVA. 2013. Hongos endóﬁtos:

fuente potencial de metabolitos secundarios

bioactivos con utilidad en agricultura y medicina .

TIP 16: 132-146. https://doi.org/10.1016/S1405-

https://doi.org/10.1515/eces-2018-0037.

ŚWISLOWSKI, P., J. KŘÍZ & M. RAJFUR. 2020. The

use of bark in biomonitoring heavy metal pollution

of forest areas on the example of selected areas in

Poland. Ecol. Chem. Eng. S. 27: 195-210.

https://doi.org/10.2478/eces-2020-0013.

TEICHERT, I., M. NOWROUSIAN, S. PÖGGELER &

U. KÜCK. 2014. The ﬁlamentous fungus Sordaria

macrospora as a genetic model to study fruiting

body development. Adv. Genet. 87: 199-244.

https://doi.org/10.1016/B978-0-12-800149-3.00004-4.

VON ARX, J. A. 1970. The Genera of Fungi Sporulating

in Pure Culture. Verlag von Cramer, England.

WRIGHT, E. R., A. MANDOLESI, M. C. RIVERA & B.

A. PÉREZ. 2010. Neofusicoccum parvum, blueberry

pathogen in Argentina. XXVIII International

Horticultural Congress on Science and Horticulture

for People (IHC2010): International Symposium.

926: 619-623.

https://doi.org/10.17660/ActaHortic.2012.926.89.

YANG, X., C. GU & Y. LIN. 2020. Anovel fungal laccase

from Sordaria macrospora k-hell: expression,

characterization, and application for lignin

degradation. Bioprocess Biosyst. Eng. 43: 1133-

1139. https://doi.org/10.1007/s00449-020-02309-5.

ZARLAVSKY, G. E. 2014. Histología Vegetal: Técnicas

Simples y Complejas. Sociedad Argentina de

Botánica. Argentina.

8

88X(13)72084-9 .

SCHWARZE, F.W. M. R, J. ENGELS&C. MATTHECK.

000. Fungal Strategies of Wood Decay in Trees.

2

Springer-Verlag, Germany.

SISTEMA NACIONAL DE VIGILANCIA

Y

MONITOREODEPLAGAS[online]. Disponibleen:

https://www.sinavimo.gob.ar/plaga/botryosphaeria-

dothidea. [Acceso: 23 diciembre 2021].

SIMPSON, E. H. 1949. Measurement of diversity. Nature

1

63: 688-688. https://doi.org/10.1038/163688a0.

SLIPPERS, B., W. A. SMIT, P. W. CROUS, T. A.

COUTINHO, B. D. WINGFIELD & M. J.

WINGFIELD. 2007. Taxonomy, phylogeny and

identiﬁcation of Botryosphaeriaceae associated with

pome and stone fruit trees in South Africa and other

regions of the world. Plant Pathol. 56: 128-139.

https://doi.org/10.1111/j.1365-3059.2006.01486.x

SRINIVASAN,C.,T.M.D’SOUZA,K.BOOMINATHAN

&

C. A. REDDY. 1995. Demonstration of laccase

in the white rot basidiomycete Phanerochaete

685